商品屬性：
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貨號 |
規(guī)格 |
產(chǎn)品名稱 |
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A-PJ1075-100T |
100T |
Virus DNA/RNA cDNA Synthesis Kit |
儲存條件：
Virus DNA/RNA cDNA Synthesis Kit請置于-20°C，可保存 3 年；避免反復凍融。
產(chǎn)品介紹：
本試劑盒采用穩(wěn)定高效的反轉錄預混體系 5×Golden RT MasterMix 進行 RNA 的反轉錄反應，使用時只需加入模 板、引物和 RNase Free H2O 即可，大大簡化了操作過程、 提高了效率、減少了操作過程中的人為誤差。具有快速簡便、 重復性高、特異性好、靈敏度高和穩(wěn)定性好的特點。專用于 病毒 DNA/RNA 樣品的反轉錄反應。 該預混體系包含點突變致 RNase H 活性缺失的 Golden MLV Reverse Transcriptase 反轉錄酶、dNTP、反應 Buffer 和 RNase Inhibitor。該試劑盒采用的反轉錄酶去除了 RNase H 活性，從而避免反轉錄過程中降解 RNA。同時經(jīng)過突變文 庫篩選，使得其熱穩(wěn)定性更強，可耐受 55℃高溫反應。相比 于低溫條件下反轉錄反應，采用高溫反轉錄可顯著打開 RNA 二級結構，從而提高復雜 RNA 模板的擴增性能、提高反轉 錄 cDNA 的長度和產(chǎn)量，從而提高后續(xù)檢測的靈敏度。合成 的**鏈 cDNA 可廣泛用于 2nd Strand 的合成、雜交、PCR 擴增、Real-Time PCR 反應等。
質量控制：
1. 按以下組分配制反轉錄反應液
病毒 DNA/RNA 樣品 2~10μl
5×Golden RT MasterMix 4μl
*20×Random Primer 1μl
Rnase Free H2O Up to 20μl
*注：反轉錄引物可根據(jù)需要改用特異性引物。
2.根據(jù)實際情況反轉錄可選擇快速程序或標準程序
快速程序
37°C 15~30min（cDNA 合成）
85°C 5min（失活 MLV）
標準程序
25°C 10min（引物配對）
55°C 30~60min（cDNA 合成）
85°C 5min（失活 MLV）
注：通常在定量 PCR 實驗中使用快速程序進行反轉錄（反轉錄效率>80%），在進行高 GC 含量、含復雜二級結構、長片段的模板轉錄時采用標準程序（反轉錄效率>100%）。
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