公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實驗效果好，我司為您提供免費代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱：肺癌細(xì)胞；A549
形態(tài)特性：上皮樣；多角形

生長特性：貼壁生長

特征特性：該細(xì)胞系是1972年由GiardDJ通過肺癌組織移植培養(yǎng)建系的，源自一位58歲的白人男性。A549能通過胞苷二磷脂酰膽堿途徑合成富含不飽和脂肪酸的卵磷脂；角蛋白陽性。

培養(yǎng)條件：RPMI1640+10%FBS

傳代方法：消化CQ-5分鐘，1:2,3天內(nèi)可長滿
實驗材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實驗方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘撸瑢⒀b有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。 

三氟磺 98%AlphaNAG (Human AlphaN-acetylglucosaminidase) ELISA Kit  人αN已酰氨葡糖苷酶兔腫瘤壞死因子配體相關(guān)分子-1A(TL1A)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

三氧膦 98%Alpha2-PI (Human Alpha2-plasmin inhititor) ELISA Kit  人α2纖溶酶抑制物兔谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶κ1(GSTκ1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

三 97%人高香草(HVA) ELISA Kit  人高香草兔11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

三氟磺酐 98%人煙酰腺嘌呤二核苷(NADPH) ELISA Kit  人煙酰腺嘌呤二核苷兔過氧化還原酶1(PRDX1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

四丁溴化 98%CNR-1(Human cadherln-related neuronal receptor1) ELISA Kit  人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1兔胱抑素C(Cys-C)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2-硫代 98%ATM(Human Ataxia angiectasia mutated) ELISA Kit  人擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變因兔間隙連接蛋白31(CX31)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

地塞米松鈉 98%AhR(Human aryl hydrocarbon receptor) ELISA Kit  人芳香烴受體兔粒集落激因子受體(GCSFR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

四化硅 AR,99.50%SMAF(Human Specifie Macrophage Arming Paetot) ELISA Kit  人特異性巨噬武裝因子兔白介素5(IL-5)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

四化硅 99.9999%MF/MPF(Human maturation promoting factor) ELISA Kit  人促有絲分裂因子兔蛋白酪氨酶受體O(PTPRO)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

四化硅 99.999999%ATF-1(Human activating transcription factor-1) ELISA Kit  人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1兔突觸體相關(guān)蛋白25(SAP25)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

四化硅 99.9999999%HAMA(Human antimous antibody) ELISA  人抗鼠抗體兔生長因子受體結(jié)合蛋白14(Grb14)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

化亞銅 CPVGCC(Human voltage-gated calcium channel) ELISA Kit  人鈣離子通道抗體兔抗鈣調(diào)素特異抗體(CAM-Ab)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

胞苷-5'-單二鈉鹽 99%BrdU(Human Bromodeoxyuridine) ELISA Kit  人溴脫氧核苷尿嘧啶兔性別決定區(qū)Y框蛋白18(SOX18)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

間酰 99%FSP(Human Fibroblast surface protein) ELISA Kit  人纖維母表面抗原兔白共同抗原(LCA/CD45)酶聯(lián)吸附測定試劑盒

2’-脫氧鳥苷 99%SLPI(Human secretory leukocyte protease inhibitor) ELISA Kit  人性白蛋白酶抑制因子兔集聚蛋白(AGRN)酶聯(lián)吸附測定試劑盒
A549細(xì)胞眼小畸形關(guān)聯(lián)轉(zhuǎn)錄因子Elisa試劑盒Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗雞IgGNQO1  醌氧化還原酶抗體

精氨脫亞酶Elisa試劑盒生物素標(biāo)記的兔抗雞IgMNPY2R  神經(jīng)肽Y受體2抗體

色氨酰tRNA合成酶Elisa試劑盒Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗雞IgMNPY1R  神經(jīng)肽Y1受體抗體

抗胰蛋白酶抗體Elisa試劑盒Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗雞IgMNPY/Neuropeptide Y  神經(jīng)肽Y抗體

抗素前體Elisa試劑盒Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗雞IgMNPTX2  神經(jīng)穿透素2抗體

白分化抗原4Elisa試劑盒Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗雞IgMNPTX1  神經(jīng)正五聚體1抗體

過氧化還原酶1Elisa試劑盒PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗雞IgMNPRC/Natriuretic Peptide Receptor C  利鈉肽受體C抗體

粒蛋白1Elisa試劑盒PE-Cy7標(biāo)記的兔抗雞IgMNPRB  利鈉肽受體B抗體

器支原體IgG抗體Elisa試劑盒堿性酶（AP）標(biāo)記的兔抗雞IgMNPR2L/G21 protein  G21蛋白質(zhì)抗體