實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 

4、培養(yǎng)皿1個，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 

6、細(xì)胞計數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺； 

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測服務(wù)，同時提供新價格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。
細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。 

端粒重復(fù)序列結(jié)合因子2(TERF2)ELISA試劑盒 ≥97% (HPLC)2,4-二羥基苯甲酸甲酯 98%焦磷酸鈉(AR)

端粒重復(fù)序列結(jié)合因子1(TERF1)ELISA試劑盒防己諾林堿 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>98% 3,4-二羥基苯甲酸 ≥97.0% (T)碳酸氫銨(AR)

端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(TERT)ELISA試劑盒銀杏酸(C17:1) 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%3,4-二羥基苯甲酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥97.0% (HPLC)氯化銨(AR)

端粒酶(TE)ELISA試劑盒高三尖杉酯堿  分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%香草酸 98%水楊酸(AR)

端粒保護(hù)蛋白1(POT1)ELISA試劑盒煙堿 分析標(biāo)準(zhǔn)品（劇品）3-氨基芐 98%甲殼素；幾丁質(zhì)

蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M3(M-AChR M3)ELISA試劑盒原堿   98%對氨基苯 98%輔酶 A

蕈堿型乙酰膽堿受體(M-AChR)ELISA試劑盒硫酸奎尼丁 98%鄰氨基苯 98%多效唑

性休克綜合征素1(TSST-1)ELISA試劑盒茄尼 96%對 97%酸鈉十水(AR)

疊氮胸苷(AZT)ELISA試劑盒雷公藤內(nèi)酯甲  分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%四氫吡喃酮 97%硫酸聯(lián)氨(AR)

凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒2-過氧化丁酮 >52%(GC)2,5-二羥基苯甲酸 98%多酚氧化酶

凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)ELISA試劑盒2-過氧化丁酮 CP3,5-二羥基苯甲酸 97%硫酸銅五水(AR)

凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒丁酸酐 98%一氯化 ARN-乙酰-D-氨基葡萄糖

凋亡相關(guān)因子配體(FASL)ELISA試劑盒鄰 99%一氯化 ACS無水三氯化鐵(AR)

凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒鄰 分析標(biāo)準(zhǔn)品，99.5%三氯化 AR,97.0%硫酸錳一水(AR)

凋亡相關(guān)因子(Fas)ELISA試劑盒3,5-二酚 98%2,3-二氯苯 98%氯化銣(分子生物學(xué)級)

凋亡相關(guān)蛋白激酶(DAPK)ELISA試劑盒獨(dú)石氧化鈮 電子級99.98%N-氨乙基哌 99%多聚賴氨酸
UMR-85細(xì)胞龜分支桿菌龜型亞種

種屬: Mycobacterium│Mycobacterium chelonae subsp chelonae

提供形式: 凍干物

**等級: 3

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 研究

生長條件: 37

存儲條件: 真空冷凍干燥法

萎縮芽孢桿菌

種屬: Bacillus│atrophaeus

提供形式: 凍干物

**等級: 1

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: Hot air and ethyleneoxide gas;sterilization contro

培養(yǎng)基: 0002

生長條件:
培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對具體細(xì)胞的產(chǎn)品說明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計數(shù)器、細(xì)胞計數(shù)儀按照臺盼藍(lán)拒染法或者使用自動細(xì)胞計數(shù)儀測定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應(yīng)不時輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C。或者，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。