公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供新價(jià)格、說(shuō)明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

實(shí)驗(yàn)材料： 

1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 

2. 100ml燒杯2個(gè)；
3、50ml離心筒2個(gè) 

4、培養(yǎng)皿1個(gè)，細(xì)胞培養(yǎng)瓶1個(gè) 

5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個(gè)；無(wú)菌玻璃攪拌棒1個(gè) 

6、細(xì)胞計(jì)數(shù)板1塊； 

7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 

8、酒精燈1臺(tái)； 

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

凍存培養(yǎng)基：

凍存細(xì)胞時(shí)必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應(yīng)含有DMSO 或者甘油等冷凍保護(hù)劑。還可使用專門配制的完全凍存培養(yǎng)基。

1）細(xì)胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的即用型完全凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過(guò)優(yōu)，可改善細(xì)胞活力以及解凍后的細(xì)胞復(fù)蘇效果。 

2）凍存培養(yǎng)基是一種化學(xué)成分確定的、無(wú)蛋白、無(wú)菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細(xì)胞和原代細(xì)胞 (黑色素細(xì)胞除外) 的凍存。 

培養(yǎng)細(xì)胞凍存方案：

以下實(shí)驗(yàn)方案介紹了培養(yǎng)細(xì)胞凍存的一般流程。詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案，必須參閱針對(duì)具體細(xì)胞的產(chǎn)品說(shuō)明書。 

1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲(chǔ)存，直至使用。請(qǐng)注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細(xì)胞系。

2.凍存貼壁細(xì)胞時(shí)，利用傳代時(shí)所用方法輕柔地使細(xì)胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來(lái)。用該細(xì)胞所需完全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞。

3.采用血球計(jì)數(shù)器、細(xì)胞計(jì)數(shù)儀按照臺(tái)盼藍(lán)拒染法或者使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定總細(xì)胞數(shù)和活細(xì)胞百分比。根據(jù)所需活細(xì)胞密度，計(jì)算凍存培養(yǎng)基需要量。

4.以大約100-200×g的離心力將細(xì)胞懸液離心5至10分鐘。在無(wú)菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動(dòng)細(xì)胞沉淀。

注：離心速度和時(shí)間取決于細(xì)胞種類。

5.用預(yù)冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞沉淀，將其調(diào)整至該細(xì)胞適合的活細(xì)胞密度。

6.將細(xì)胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時(shí)，應(yīng)不時(shí)輕輕混合細(xì)胞，使其保持均勻的細(xì)胞懸液狀態(tài)。

7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細(xì)胞，使溫度每分鐘大約降低1°C?；蛘?，將裝有細(xì)胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過(guò)夜。

肺炎衣原體抗原(Cpn)ELISA試劑盒D-蛋氨酸 99%霉酚酸嗎啉乙酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%聚乙二8000

肺炎衣原體抗體IgM(Cpn-IgM)ELISA試劑盒L-正纈氨酸 99%新橙皮苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥97%氯化鋰(分子生物學(xué)級(jí))

肺炎衣原體抗體IgA(Cpn-IgA)ELISA試劑盒L-正亮氨酸 99%新芒果苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%硫酸亞鐵銨六水

肺炎衣原體抗體(Cpn-Ab)ELISA試劑盒D-鳥氨酸鹽酸鹽 99%蕓香柚皮苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%紅四氮唑

肺特異性X蛋白(LUNX)ELISA試劑盒L-鳥氨酸鹽酸鹽 98%補(bǔ)骨脂素  分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%磺甲氧噠

肺耐藥蛋白(LRP)ELISA試劑盒L-苯氨酸叔丁酯鹽酸鹽 99%補(bǔ)骨脂素  98%磺甲氧噠(標(biāo)準(zhǔn)品)

肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒DL-苯氨酸 >98.0%(HPLC)枸橘苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%TCEP；三-(2-甲酰乙基)膦鹽酸鹽

肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒L-苯氨酸甲酯鹽酸鹽 98%苦鬼臼素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%N，N-二甲酰(分子生物學(xué)級(jí))

肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)ELISA試劑盒D-苯氨酸 98%原薯蕷皂苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%硫代硫酸鈉五水(AR)

肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒D-脯氨酸 99%槲皮苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%化鈉(AR)

肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒D-絲氨酸甲酯鹽酸鹽 98%金絲桃苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%可溶性淀粉

肺表面活性蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒D-絲氨酸 98.5%槲皮素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98.5%硫脲

肺癌標(biāo)志物DR-70(DR-70TM)ELISA試劑盒DL-絲氨酸 98%槲皮素 97%氯化鈷六水(分子生物學(xué)級(jí))

腓骨蛋白2(FBLN2)ELISA試劑盒L-絲氨酸甲酯鹽酸鹽 98%吳茱萸次堿 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%氯化鈷六水(AR)

肥胖抑制素(Obestatin)ELISA試劑盒D-蘇氨酸 99%吳茱萸次堿 98%苯酚,酚

肥大類胰蛋白酶(MCT)ELISA試劑盒D-色氨酸甲酯鹽酸鹽 98%迷迭香酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥97%異戊
U251 MG/TMZ+LUC(3000)細(xì)胞問(wèn)號(hào)狀鉤端螺旋體

種屬: Leptospira│interrogans

提供形式: 凍結(jié)物

**等級(jí): 2

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 血清學(xué)分型　Tarassovi　tarassovi

培養(yǎng)基: CM0114

生長(zhǎng)條件: 37℃

傷寒沙門氏菌

種屬: Salmonella│typhi

提供形式: 凍干物

**等級(jí): 2

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 噬菌體分型用 Vi F4　　　9,12,Vi　d　-

培養(yǎng)基: CM0051

生長(zhǎng)條件: 37℃