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細(xì)胞培養(yǎng)的基本步驟
日期：2025-04-09 15:55
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摘要：
細(xì)胞培養(yǎng)的基本步驟：
1、原代培養(yǎng)：從供體內(nèi)取出組織，經(jīng)機械或消化分離成單個細(xì)胞或單一型細(xì)胞群，在無菌、適當(dāng)溫度和營養(yǎng)條件下，生存、生長和繁殖。簡單步驟為：剪切組織-消化分離-擴增培養(yǎng)。
2、傳代培養(yǎng)：當(dāng)細(xì)胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用PBS清洗，加入胰蛋白酶消化，分離細(xì)胞，再按一定比例接種到新的培養(yǎng)瓶中。一般2～3d后應(yīng)換一次生長液。
3、體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)：將瘤細(xì)胞懸液接種到動物體內(nèi)，形成腫瘤，再從腫瘤中分離細(xì)胞，進行培養(yǎng)。
4、細(xì)胞凍存：將細(xì)胞懸液與凍存液按一定比例混合，...
細(xì)胞培養(yǎng)的基本步驟：
1、原代培養(yǎng)：從供體內(nèi)取出組織，經(jīng)機械或消化分離成單個細(xì)胞或單一型細(xì)胞群，在無菌、適當(dāng)溫度和營養(yǎng)條件下，生存、生長和繁殖。簡單步驟為：剪切組織-消化分離-擴增培養(yǎng)。
2、傳代培養(yǎng)：當(dāng)細(xì)胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用PBS清洗，加入胰蛋白酶消化，分離細(xì)胞，再按一定比例接種到新的培養(yǎng)瓶中。一般2～3d后應(yīng)換一次生長液。
3、體內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)：將瘤細(xì)胞懸液接種到動物體內(nèi)，形成腫瘤，再從腫瘤中分離細(xì)胞，進行培養(yǎng)。
4、細(xì)胞凍存：將細(xì)胞懸液與凍存液按一定比例混合，裝入凍存管，放入-80℃冰箱，若需長期保存需要再轉(zhuǎn)移到液氮中。
5、細(xì)胞復(fù)蘇：將凍存細(xì)胞從液氮中取出，迅速在37℃水浴中解凍，加入預(yù)熱的含血清的培養(yǎng)基，離心，棄上清液，加入新的培養(yǎng)基，放入孵箱中，培養(yǎng)。凍存與細(xì)胞復(fù)蘇需要遵循慢凍速溶的原則。