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生化試劑，標(biāo)準(zhǔn)品,對(duì)照品，PCR試劑盒，?核酸檢測(cè)試劑盒，熒光定量檢測(cè)試劑盒，生化試劑盒?，比色法試劑盒，酶活性檢測(cè)試劑盒，ELISA試劑盒，酶聯(lián)免yi檢測(cè)試劑盒，試劑盒，ELISA試劑盒，抗體，重組蛋白，分光光度法檢測(cè)試劑盒，細(xì)胞株，原代細(xì)胞，細(xì)胞培養(yǎng)基，標(biāo)準(zhǔn)溶液產(chǎn)品。代理并銷售進(jìn)口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細(xì)胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產(chǎn)品。
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分光光度法的作用及定量測(cè)定方法
日期：2025-04-19 17:03
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摘要：
分光光度法是通過測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度，對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法。它具有靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、快速等優(yōu)點(diǎn)，是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中*常用的實(shí)驗(yàn)方法。許多物質(zhì)的測(cè)定都采用分光光度法。在分光光度計(jì)中，將不同波長(zhǎng)的光連續(xù)地照射到一定濃度的樣品溶液時(shí)，便可得到與不同波長(zhǎng)相對(duì)應(yīng)的吸收強(qiáng)度。
利用分光光度法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量測(cè)定，主要有以下幾種方法：
利用分光光度法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量測(cè)定，主要有以下幾種方法：
1、標(biāo)準(zhǔn)管法
將待測(cè)溶液與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液在相同條件下分別測(cè)定A值，然后按下式求得待測(cè)溶液中物質(zhì)的含量。
CT=（AT/AS）*CS
2、標(biāo)準(zhǔn)曲線法
先配制一系列濃度由小到大的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別測(cè)定出它們的A值，以A值為橫坐標(biāo)，濃度為縱坐標(biāo)，作標(biāo)準(zhǔn)曲線（A~c工作曲線），可以求出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程。在測(cè)定待測(cè)溶液時(shí)，操作條件應(yīng)與制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)相同，以待測(cè)液的A值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出（得到）該樣品的相應(yīng)濃度。
3、吸光系數(shù)法
當(dāng)某物質(zhì)溶液的濃度為1mol/L，厚度為1cm時(shí)，溶液對(duì)某波長(zhǎng)的吸光度稱為該物質(zhì)的摩爾吸光系數(shù)，以ε表示。ε值可通過實(shí)驗(yàn)測(cè)得，也可由手冊(cè)中查出。例如亞鐵氮二雜菲配合物的ε值 等于11000 L/cm·mol
已知某物質(zhì)ε值，只要測(cè)出其A值再根據(jù)下式便可求得樣品的濃度：c=A/ε。